描述
PowerMicrobial® Midi DNA Isolation Kit专门设计用于从含有至少108个细胞/ml 的50ml细菌培养液中提取DNA。可提取多种微生物,如革兰氏阴阳性菌、真菌、酵母等。不同微生物类型和细菌培养液浓度决定了DNA得率。滤膜DNA更大吸附能力是100μg。
PowerMicrobial® Midi DNA Isolation Kit的成功之处在于其高效的细胞裂解能力。研磨珠破碎加上苯酚/氯仿*的联合作用,就算DNA含量很低的微生物类型也能获得理想得率。获得的纯净DNA不含有任何活的微生物细胞或孢子等,实验室提取病料病原微生物时也有安全保证(注意:给每次提取得到的DNA做平板计数,以确保安全)。为了细胞充分裂解只需要使用一台涡旋混合仪及适配器 和一些简单的实验室常用仪器设备。
去除培养基、经过洗涤的微生物细胞用研磨缓冲液重悬于含有研磨珠的套管内。在苯酚、去垢剂和机械力、研磨珠联合作用下,细胞崩解。细胞成分被苯酚灭活。释放出来的DNA吸附在硅胶滤膜上,经过洗涤洗脱重悬于DNA-free 10mM Tris缓冲液中。获得的DNA不含有微生物细胞,这点在病原微生物实验室尤其重要。
*自备