描述
The UltraClean® Endotoxin Removal Kit专门设计用于去除已抽提质粒DNA中的内毒素。高盐溶液需要稀释到100mM甚至更低盐浓度。加入UltraClean® Endotoxin Removal Reagent,短时间冰孵育。65℃加热然后离心。溶液分层,上层水相含质粒DNA,下层油状相含内毒素。根据需要重复上述步骤,重复次数越多质粒DNA内毒素含量越低。
若提取得到的DNA浓度太稀,需要使用 Endotxin-Free Precipitation Reagnts 【试剂盒已包含(酒精、水、5M NaCl)】经过处理后质粒DNA内毒素含量将低于0.1 EU/µg,可直接用于转染、微注射及其它相关应用。
内毒素作为脂多糖类物质,存在于革兰氏阴性细菌(如大肠杆菌)的细胞壁。通常会随着质粒被一起提取,能显著降低内毒素敏感细胞株的转染效率。在转染实验中常导致结果无法判定和解释。 |
规格
最终内毒素水平 |
< 0.1 EU/µg |
应用 |
转染、微注射 |
保存条件室温保存2年。
文献
- Laroche-Pierre, S., Jodoin, J., and LeBlanc, A.C. Helix 2 is Necessary and Sufficient for Prion Protein’s Anti-Bax Function. Journal of Neurochemistry. 108(4): 1019-1031 (2009).
- Lin, D.T.S., Jodin, J., Baril, M., Goodyer, C.G., LeBlanc, A.C. Cytosolic Prion Protein is the Predominant Anti-Bax Prion Protein Form in the Anti-Bax Function. Biochimica et Biophysica Acta (BBA). 1783(10): 2001-2012 (2008).
试剂盒组分
组分 |
12615 |
Endotoxin Removal Reagent Endotoxin-Free Ethanol Endotoxin-Free Water Endotoxin-Free 5M NaCl |
1 x 25 ml 2 x 30 ml 1 x 10 ml 1 x 10 ml | |