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Northern- blotting技术服务

  Northern blot是研究基因表达的更严谨的方法之一,可以定量分析组织中某一特异mRNA的表达丰度,根据其迁移位置也可以判断基因表达转录物的大小。该技术应用十分广泛,常用于分析RNA样品中特定mRNA的大小和丰度,也可用于基因表达调控、基因结构及功能、遗传变异等研究。RNA经变性琼脂糖凝胶电泳分离,转印迹至尼龙膜等固相支持膜上,再与标记的特异性探针杂交,从而分析固定于膜上的mRNA的数量和大小。常用的RNA分析方法有甲醛变性电泳、乙二醛/DMSO变性电泳和狭线印迹杂交三种方法。我公司主要进行甲醛变性电泳方法。
服务内容:
总RNA制备,探针标记,电泳,转移,杂交,显影,图片采集。
技术要点:
1,总RNA的提取及mRNA纯化是更关键的第一步,必须保证mRNA的完整性。
2,转膜效率直接影响检测灵敏度。
3,探针模板纯度是探针标记的关键,我们将模板经切胶回收和纯化,探针质量绝对有保证。
4,杂交、洗膜条件的控制需要操作人员的经验和技巧。
样品要求:
1,客户提供质粒:质粒大小,质粒电泳图谱(要求大小正确、无拖尾、无杂带),质粒总量>50ng,注明是否提供引物。
2,客户提供探针:探针电泳图谱(要求无拖尾、无杂带)、紫外分析数据(A260/280=1.6-1.8,A260/280=1.6-2.0)。
3,客户提供总RNA:要求总量>30μg ,浓度>15μg/μl,总RNA保温电泳图18s~28s,条带清晰,点样孔干净,A260/A280>1.9。
4,客户提供组织样品:要求各样品至少200mg组织或108个细胞样品。
*请您将样品放入离心管中,在-20℃ 或-80℃条件下运输。
操作程序:
1,我们在受到样品后,首先进行初步检测(变性胶电泳分析RNA含量及质量)。
2,实验结束后,为您提供完整的实验报告(Control反应有明显条带为正常结果)。
服务周期:服务时间为15-20个工作日。
收费标准:


项目

服务标准

收费标准

总RNA提取

 

250元/样品

Northern blotting

总RNA提取,探针标记,电泳,转膜,杂交,显色,照片采集

5000元/组样品

(一个基因,8个样品;同一基因,每增加8个样品,增加3500元)。
结果提交:
包括实验步骤、杂交效果扫描图片、探针电泳图、紫外分光光度检测数值等。

公司电话:010-65945597/65919547    传 真:010-65919547   E-mail:biogenro88@126.com
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