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斑点杂交/逆向斑点杂交(地高辛标记)

斑点杂交:
多个核酸样品(少量)点样在硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上,经80℃烘烤后牢固地固定,单个标记探针与膜杂交,检测用放射性探针自显影或非放射性探针显色。可用于DNA或RNA分析。
逆向斑点杂交:
多个探针点在膜上,单个样品与膜杂交。
客户提供材料:组织、细胞、总RNA或mRNA,
基本流程:
(1)菌落PCR→PCR纯化(或者不经纯化)→电泳检测→点膜→固定化处理
(2)探针制备→探针纯化→探针定量→探针标记
(3)膜杂交→洗涤→扫描(磷屏成像系统)→数据提取→数据分析
提示信息:
(1)斑点杂交:探针应>500bp,如探针过短,标记产物会偏短,从而在洗涤时易去除,使杂交信号变弱。
(2)如果转录本的丰度较低,可能杂交结果为阴性。
(3)逆向斑点杂交:为比较两个样品中的基因表达变化,必须在膜上放置对(housekeeping gene),这些对照由客户选定,housekeeping gene是在各种样品中表达较稳定但不是绝对相同。
(4)杂交实验周期:15-20个工作日。
收费标准:


项目

服务标准

收费标准

菌落PCR

 

10元/样品

RNA提取

 

250元/样品

RT-PCR

 

400元/样品

斑点杂交/逆向斑点杂交

总RNA提取,探针标记,电泳,转膜,杂交,显色,照片采集

3000元/组样品

 

公司电话:010-65945597/65919547    传 真:010-65919547   E-mail:biogenro88@126.com
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