斑点杂交: 多个核酸样品(少量)点样在硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上,经80℃烘烤后牢固地固定,单个标记探针与膜杂交,检测用放射性探针自显影或非放射性探针显色。可用于DNA或RNA分析。 逆向斑点杂交: 多个探针点在膜上,单个样品与膜杂交。 客户提供材料:组织、细胞、总RNA或mRNA, 基本流程: (1)菌落PCR→PCR纯化(或者不经纯化)→电泳检测→点膜→固定化处理 (2)探针制备→探针纯化→探针定量→探针标记 (3)膜杂交→洗涤→扫描(磷屏成像系统)→数据提取→数据分析 提示信息: (1)斑点杂交:探针应>500bp,如探针过短,标记产物会偏短,从而在洗涤时易去除,使杂交信号变弱。 (2)如果转录本的丰度较低,可能杂交结果为阴性。 (3)逆向斑点杂交:为比较两个样品中的基因表达变化,必须在膜上放置对(housekeeping gene),这些对照由客户选定,housekeeping gene是在各种样品中表达较稳定但不是绝对相同。 (4)杂交实验周期:15-20个工作日。 收费标准:
项目
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服务标准 |
收费标准 |
菌落PCR |
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10元/样品 |
RNA提取 |
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250元/样品 |
RT-PCR |
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400元/样品 |
斑点杂交/逆向斑点杂交 |
总RNA提取,探针标记,电泳,转膜,杂交,显色,照片采集 |
3000元/组样品 |
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